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        血液/循環核酸提取方案

        更新時間:2020-05-06瀏覽:3327次

        每當聽到要提取血液樣本的核酸

        你是不是也和我一樣有一種一臉懵的感覺?

        是哪種物種的血?

        (哺乳動物,禽類,還是兩棲類?)

        是什么類型的樣本?

        (新鮮血液,血凝塊,凍存血,干血斑,血清血漿…)

        樣本體積多大?

        如何選擇提取方法?

        ……

        血液/循環核酸提取方案

        馬上告訴你答案!

         

        血液核酸提取方案

        樣本特點: 

        材料成分復雜:血液樣本中包含紅細胞、白細胞、蛋白質、血小板等,提取時要保證裂解充分的同時去除無關雜質。

        樣本保存:

        新鮮血液可直接收集于抗凝血管,保存于-20℃。大體積血液,可先裂紅,將收集到的白細胞-20℃保存,保存效果更加。

        血液中RNA在室溫兩小時即會被降解,選擇新鮮血液進行提取

        。如有需長期保存,建議選擇RNA穩定劑RNALock 血液RNA穩定劑 (DP440,TIANGEN)進行處理,處理后的血液可在常溫保存2天,4℃保存1周,-20℃度保存半年。

        小體積(200μl)血液DNA提取方案:

        大體積(0.25-5ml)血液DNA提取方案:

        血液RNA提取方案:

        干血斑核酸提取方案

         

        樣本特點

        紙片吸附血液樣本有限,充分裂解后進行離心,需要盡可能提高提取得率和純度。

        樣本保存

        常溫保存

        干血斑DNA提取方案

         循環核酸提取方案

        樣本特點

        循環核酸在血清/血漿等體液中的含量很低,在腫瘤等疾病分析中樣品珍貴,對提取得率要求很高。

        樣本保存

        用于提取循環核酸的血清、血漿樣本,應使用可以穩定樣本中白細胞的血液保存管進行儲存,盡可能減少在保存過程中因白細胞破裂釋放基因組DNA,干擾循環核酸提取及下游檢測實驗結果。

        循環核酸DNA提取方案

         

         

         

         

         

         

         

         

         

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